Bioquimica.

AMINOACIDOS Y PROTEINAS

Aminoacidos no alifaticos	Gli, Val, Ile, Leu, Ala, Pro*
Aminoacidos aromaticos	Trp, Tir, Phe
Aminoacidos hidroxilados**	Ser, Thr
Aminoacidos con azufre	Cis, Met
Aminoacidos con amina	Gin, Asa
Aminoacidos ácidos	Asc, Glu
Aminoacidos basicos	Lys, Arg*, His**

*La prolina contiene un carbono alfa y un nitrogeno alfa que forman un heterociclo.
**Los aa interaccionan con puentes de hidrogeno
***Contiene un grupo guanadino
****Contiene un grupo imidazol

El punto isoelectrico de un aminoacido se calcula con la formula: pI = 1/2( pka1+ pk2)

METODOS DE PURIFICACION

Cromatografia en capa fina
Se basa en el reparto entre dos fases (una estacionaria y una movil). Dedido a que la distancia de la molécula en la muestra presenta diferentes coeficientes de reparto
Cromatografia de intercambio ionico
Los aminoacidos se hacen pasar por una columna de resina con un grupo cationico. Los aminoacidos segun su carga se van a unir a la columna y luego mediante un cambio gradiral de pH se van eluyendo segun su punto isoelectrico.
Dialisis
Es una membrana semipermiable que elimina proteinas de pajo peso molecular y alguna sales.
Cromatografia de exclusión
Se utilizan geles, en la cual salen primero las proteinas más grandes y al ultimo las mas pequeñas.
Electroforesis Nativa
Se utiliza una solución amortiguadora a pH constante. La migración esta en función de su peso molecular y su carga.
Electroforesis Desnaturalizante SDS
Rompe las interacciones no covalentes, elimina la carga neta y por lo tanto migra en función del peso. El DTT Rompe los enlaces disulfuros o la estructura cuaternaria de la proteína
Cromatografia de Afinidad
Su principio es ligando-proteína. Se utilizan anticuerpos . Se recupera por salado o por salado, se recomienda utilizar al final de la purificación
Inmunoblot o Wester Blot: Se utiliza anticuerpos dirigidos a la proteína de interes. La proteína esta inmobilizada y los anticuerpos estan en solución, éste se marca por radiactividad, fluorecencia o con algun otra enzima que nos permita su detección.

ESTRUCTURA PRIMARIA DE LAS PROTEINAS: Es la secuencia estricta de los aminoácidos
ESTRUCTURA SECUNDARIA DE LAS PROTEINAS: Es el arreglo en el espacio de los a.a. adyacentes en c/u de la cadena polipptidica, sin tomar encuenta sus cadenas laterales, se encuentra estabilizada por puentes de hidrogeno , Alfa helice (los amonoacidos que la favorecen son Ala, Glu,Leu, Met, aproximadamente 3.6 a.a por vuelta ), Beta plegada
ESTRUCTURA TERCIARIA: Se refiere a la relación espacial entre todos los aminoacidos de una cadena polipeptídica. La estructura terciaria es de gran importancia por que se encuentra el sitio catalitico de laq enzima
DOMINIO: Es algo intermedio entre las estruc. 2ria y la 3ria. Se refiere a un arreglo compacto de una proteína que puede contar entre 50 y 500 a.a. y que constituye una unidad estructural distinta.
ESTRUCTURA CUATERNARIA: La presentan las proteínas que estan compuestas por más de una cadena polipeptidica

CLASIFICACION DE ENZIMAS

oxidoreductasas	Reacción redox. Transferencia de electrones
Transferasas	Transfgerencia de grupos
Hidrolasas	Reacción de hidrolisis
Liasas	Formación de dobles enlaces por eliminación
Isomerasas	Transferencia de greupos entre moleculas parta formar isomeros
Liasas	Formación de enlaces de C- C, C-O, C-N mediante reacción de condensarión y acoplamiento de ATP

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